很多的科研工作者一直的困擾:
Tris學(xué)名叫三羥甲基氨基甲烷,它和Tris-base是一個(gè)東西。
Tris-cl和Tris-HCl是一個(gè)東西,就是寫法上有所不同。
Tris-HCl就是在Tris-base的溶液中加入適當(dāng)量的鹽酸,調(diào)成你所需要的PH值罷了。
Tris系列的緩沖液可以滅菌------雖然網(wǎng)上有人說不可以。此處詳見《分子克隆》
Tris系列的緩沖液(或HEPES)可以用DEPC處理嗎?
答案:能!經(jīng)常在網(wǎng)上看到說不能的原因是因?yàn)檫@類含胺試劑加速DEPC的水解。但如果你一定要用DEPC處理的話,把DEPC的終濃度增大至1%,所達(dá)到的效果就會(huì)和0.1%的效果一樣的。
經(jīng)常實(shí)驗(yàn)的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)不少實(shí)驗(yàn)書后面的附錄中會(huì)有如下的Tris-HCl緩沖液配制圖表:
常用Tris-HCl緩沖液配制:
Tris-HCl(0.05mol/L,25℃)
50ml 0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液與x ml 0.1mol/L 鹽酸混勻后,加水稀釋至100ml
pH x/ml pH x/ml
7.10 45.7 8.10 26.2
7.20 44.7 8.20 22.9
7.30 43.4 8.30 19.9
7.40 42.0 8.40 17.2
7.50 40.3 8.50 14.7
7.60 38.5 8.60 12.4
7.70 36.6 8.70 10.3
7.80 34.5 8.80 8.5
7.90 32.0 8.90 7.0
一定要注意的是,這個(gè)表格所列出的常數(shù)是可信的,但你要考慮你買的藥品是否可信,的藥品恐怕也會(huì)有批次上的誤差,所以個(gè)人認(rèn)為,要想配準(zhǔn)Tris緩沖體系的PH值,還是在PH計(jì)監(jiān)測(cè)的同時(shí)加入鹽酸的為好(嚴(yán)禁使用微量加樣器吸取鹽酸!?。。?。